
在荧光标记的世界里现货配资最新消息,选择一款合适的染料,实验就成功了一半。百萤生物提供的AATOM™ 488 不仅继承了罗丹明家族的高水溶性,其马来酰亚胺衍生物更是为硫醇标记带来了新的维度。本文将为您深度解读这款染料的技术细节与应用技巧。
产品参数概览
产品名称:AATOM™ 488 马来酰亚胺
光学性质:Ex/Em = 499/520 nm,消光系数高,量子产率优异。
反应基团:马来酰亚胺(特异性针对巯基 -SH)。
分子量:请咨询技术支持。
溶剂:DMSO(便于配制储存液)。
储存:-15°C以下,避光干燥,避免反复冻融。
深度解读
1. 反应化学:马来酰亚胺 vs 巯基
AATOM™ 488 马来酰亚胺在pH 6.5-7.5的条件下,与目标分子的游离巯基发生迈克尔加成反应,形成不可逆的硫醚键。这种键合在后续的实验步骤(如细胞固定、变性杂交)中极为稳定。
展开剩余62%2. 光学匹配性
该染料的激发光谱完美覆盖480-515 nm区间,与常见的488 nm氩离子激光器或488 nm固态激光器高度匹配,是流式细胞仪和共聚焦显微镜的即插即用选择。
3. 超分辨成像的利器
得益于其卓越的开关循环能力和抗漂白性,AATOM™ 488 在单分子定位显微镜(如dSTORM)中能够提供足够的光子数,实现纳米级分辨率的解析;在受激发射损耗显微镜(STED)中,其 depletion 效率高,背景抑制出色。
适用范围与实验建议
标记对象:
肽段与重组蛋白:针对工程化引入的半胱氨酸残基进行位点特异性标记。
硫醇修饰的寡核苷酸:用于合成FISH探针或功能性核酸偶联物。
小分子配体:适用于药物靶点示踪或竞争性结合实验。
实验技术:
流式细胞术:建议使用1-10 nM浓度的标记探针,优化电压以获取最佳信噪比。
荧光原位杂交:标记的寡核苷酸探针需通过HPLC纯化去除未结合的游离染料,以降低背景。超分辨成像:搭配适当的成像缓冲液(如氧清除剂系统),可进一步提升STORM的定位精度。
操作小贴士
还原剂问题:由于马来酰亚胺会与还原剂(如DTT、β-巯基乙醇)反应,在标记反应前,需通过脱盐柱彻底去除样品中的还原剂。
抗体标记建议:虽然该染料可用于标记抗体,但若抗体富含二硫键现货配资最新消息,常规还原可能会破坏其结构。对于抗体标记,我们强烈推荐使用针对蛋白质优化的iFluor®系列染料,它们能提供更高的标记效率和抗体回收率。
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